E1C1人胚胎干细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

E1C1人胚胎干细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

E1C1人胚胎干细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

E1C1人胚胎干细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

TC-jcyj0027 KL1529 恶臭假单胞菌 ATCC 17485

KL1530 蛾微杆菌 ATCC8365

KL1531 多粘类芽孢杆菌 CMCC 63512

TC-jcyj0170 KL1532 多形拟杆菌 ATCC 29741

KL1533 多黏类芽孢杆菌 CMCC 63512

TC-jcyj0155 KL1534 短小芽孢杆菌

TC-jcyj0066 KL1535 短双歧杆菌 ATCC 15700

KL1536 短乳杆菌 DSMZ6235

KL1537 短密青霉 ATCC16024

TC-jcyj0065 KL1538 动物双歧杆菌

KL1539 丁香假单胞菌 NBRC14078

CASC159 KL1540 貂肺上皮细胞,Mv.1.Lu(NBL-7)细胞, Mv.1.Lu(NBL-7)

KL1541 地衣芽孢杆菌 ATCC11946

JRDC113 KL1542 低转移人肝癌细胞,MHCC97-L细胞, MHCC97-L

JRDC039 KL1543 低分化胃腺癌 BGC-823细胞, BGC-823

SUNE-1 KL1544 低分化鼻咽癌细胞系 SUNE-1细胞

KL1545 德式乳杆菌保加利亚亚种 CICC6032

TC-jcyj0076 KL1546 德氏乳杆菌乳酸亚种

TC-jcyj0068 KL1547 德氏乳杆菌保加利亚亚种

TC-jcyj0053 KL1548 岛青霉

KL1549 淡紫灰链霉菌 ACCC 40024

KL1550 淡天蓝色链霉菌 ACCC 40010

// KL1551 胆囊癌细胞,GBC-SD细胞 GBC-SD

// KL1552 胆管细胞型肝癌细胞,HCCC-9810细胞 HCCC-9810

TC-jcyj0058 KL1553 单增李斯特氏菌 ATCC 19111

KL1554 单增李斯特菌 CMCC 54002

KL1555 单核增生性李斯特氏菌 CMCC(B) 54002

KL1556 单核增生李斯特菌 CMCC 54002

TC-jcyj0059 KL1557 单核细胞增生李斯特氏菌

JRDC030 KL1558 单核细胞瘤 THP-1细胞, THP-1

TIB-202 KL1559 单核细胞白血病)THP-1细胞 THP-1

TIB-71 KL1560 单核巨噬细胞白血病)RAW 264.7细胞 RAW 264.7