E1C2人胚胎干细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

E1C2人胚胎干细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

E1C2人胚胎干细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

E1C2人胚胎干细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

TC-jcyj0117 KL1496 粪肠球菌(高耐) ATCC 51299

TC-jcyj0081 KL1497 粪肠球菌 ATCC 29212

KL1498 粪产碱菌 ATCC8750

KL1499 粪产碱杆菌 ATCC 31555

KL1500 粉状毕赤酵母 CICC 1688

KL1501 费氏志贺氏菌 CMCC 51574

TC-jcyj0121 KL1502 肺炎链球菌 ATCC 49619

KL1503 肺炎克雷伯氏菌 ATCC 10031

TC-jcyj0020 KL1504 肺炎克雷伯菌

// KL1505 肺腺癌细胞,SPC-A-1细胞 SPC-A-1

// KL1506 肺腺癌细胞,LTEP-a-2细胞 LTEP-a-2

HTB-58 KL1507 肺鳞癌细胞,SK-MES-1细胞 SK-MES-1

// KL1508 肺扁平上皮癌细胞,QG-56细胞 QG-56

CRL-1848 KL1509 肺癌细胞（淋巴结转移）NCI-H292细胞 NCI-H292

// KL1510 肺癌细胞,LLC Lewis细胞 LLC Lewis

CCL-185 KL1511 肺癌细胞,A549 [A-549]细胞 A549 [A-549]

TIB-64 KL1512 肥大细胞瘤细胞,P815细胞 P815

KL1513 菲律宾链霉菌 DSMZ40112=ATCC23905

Vero KL1514 非洲绿猴肾细胞,Vero细胞

VERO C1008 (E6) KL1515 非洲绿猴肾细胞,VERO C1008 (E6)细胞

CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] KL1516 非洲绿猴肾细胞,CV-1细胞

COS-6 KL1517 非洲绿猴肾细胞,COS-6细胞

COS-1 KL1518 非洲绿猴肾细胞,COS-1细胞

VERO C1008 (E6) KL1519 非洲绿猴非洲绿猴肾细胞,VERO C1008 (E6)细胞

CV-1 KL1520 非洲绿猴非洲绿猴肾细胞,CV-1细胞

monkey COS-7 KL1521 非洲绿猴sv40转化的肾细胞,monkey COS-7细胞

COS-1 KL1522 非洲绿猴SV40转化的肾细胞,COS-1细胞

Tsu-Prl KL1523 非雄激素依赖型前列腺癌 Tsu-Prl细胞

TC-jcyj0154 KL1524 非01群霍乱弧菌

KL1525 放射性根瘤菌 ATCC15955

CCL-136 KL1526 恶性胚胎横纹肌瘤细胞,RD细胞 RD

CRL-1619 KL1527 恶性黑色素瘤细胞,A-375 [A375]细胞 A-375 [A375]

TC-jcyj0026 KL1528 恶臭假单胞菌