G1发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

G1发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

G1发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

G1发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL1395 黄直丝链霉菌 ACCC 40046

KL1396 黄色短杆菌 ACCC 11063

KL1397 黄曲霉 ATCC28539

TC-jcyj0049 KL1398 黄绿青霉

KL1399 黄绿绿僵菌 ACCC 30199、NRRL 20422

TC-jcyj0028 KL1400 黄杆菌属 ATCC 21047

TC-jcyj0038 KL1401 环状芽孢杆菌

TMNE KL1402 化学转化小鼠鼻咽上皮细胞,TMNE细胞

TC-jcyj0114 KL1403 化脓性链球菌 ATCC 19615

KL1404 厚孢根霉 ACCC 30302

VERO E6 KL1405 猴肾细胞系 VERO E6细胞

MA-104 KL1406 猴肾细胞系 MA-104细胞

BSC-1 KL1407 猴肾细胞系 BSC-1细胞

Marc145 KL1408 猴肾细胞,Marc145细胞

M145 KL1409 猴肾C M145细胞

marc-145-EGFP-puro KL1410 猴胚胎肾上皮细胞,marc-145-EGFP-puro细胞

RF/6A KL1411 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞,RF/6A细胞

CRL-1780 KL1412 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞, RF/6A细胞 RF/6A

MSCS KL1413 猴的骨髓间充质干细胞,MSCS细胞

CCL-23 KL1414 喉表皮样癌细胞,HEp-2细胞 HEp-2

KL1415 红曲霉 ACCC 30342

KL1416 红平红球菌 ACCC 10543

CCL-137 KL1417 红白细胞白血病细胞,HEL299细胞 HEL299

CRL-1598 KL1418 横纹肌瘤细胞,A-673细胞 A-673

MA-104 KL1419 恒河猴肾细胞,MA-104细胞

LLC-MK2 KL1420 恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞

CCL-7 KL1421 恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞 LLC-MK2

FRhK-4 KL1422 恒河猴胚肾细胞,FRhK-4细胞

CRL-1688 KL1423 恒河猴胚肾细胞,FRhK-4细胞 FRhK-4

CRL-6322 KL1424 黑色素瘤细胞,B16细胞 B16

TC-jcyj0030 KL1425 黑曲霉 ATCC 16404

LGZC215 KL1426 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞,RIN-m细胞, RIN-m

KL1427 褐球固氮菌 ACCC 10096