KMB-17人胚肺二倍体细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

KMB-17人胚肺二倍体细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

KMB-17人胚肺二倍体细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

KMB-17人胚肺二倍体细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

CNE2 KL1169 人鼻咽癌细胞（低分化） CNE2细胞

SUNE1 KL1170 人鼻咽癌细胞,SUNE1细胞

HONE-1 KL1171 人鼻咽癌细胞,HONE-1细胞

HNE3 KL1172 人鼻咽癌细胞,HNE3细胞

HNE-2 KL1173 人鼻咽癌细胞,HNE-2细胞

HNE1 KL1174 人鼻咽癌细胞,HNE1细胞

CNE KL1175 人鼻咽癌细胞,CNE细胞

CNE-2Z KL1176 人鼻咽癌细胞,CNE-2Z细胞

CNE-1 KL1177 人鼻咽癌细胞,CNE-1细胞

6-10B KL1178 人鼻咽癌细胞,6-10B细胞

5-8F KL1179 人鼻咽癌细胞,5-8F细胞

CNE-2Z KL1180 人鼻咽癌母系细胞,CNE-2Z细胞

RT4 KL1181 人膀胱移行细胞乳头瘤细胞,RT4细胞

T24 KL1182 人膀胱移行细胞癌细胞,T24细胞

UM-UC-3 KL1183 人膀胱移行细胞癌 UM-UC-3细胞

SW 780 KL1184 人膀胱移行细胞癌 SW 780 细胞

CASC115 KL1185 人膀胱移行细胞癌 J82细胞, J82

ScaBER KL1186 人膀胱鳞癌细胞,ScaBER细胞

CRIC078 KL1187 人膀胱鳞癌 ScaBER细胞, ScaBER

T24 KL1188 人膀胱癌移行细胞癌细胞,T24细胞

T24-EGFP KL1189 人膀胱癌细胞,T24-EGFP细胞

HT-1376 KL1190 人膀胱癌细胞,HT-1376细胞

EJ KL1191 人膀胱癌细胞,EJ细胞

BIU-87 KL1192 人膀胱癌细胞,BIU-87细胞

CASC011 KL1193 人膀胱癌细胞,5637细胞, 5637

5637（HTB-9） KL1194 人膀胱癌细胞,5637（HTB-9）细胞

LGZC021 KL1195 人瘢痕疙瘩成纤维细胞,HKF细胞, HKF

U937 KL1196 人白血病细胞,U937细胞

SK KL1197 人白血病细胞,SK细胞

KG-1 KL1198 人白血病细胞,KG-1细胞

HL-60 KL1199 人白血病细胞,HL-60细胞

Daudi KL1200 人白血病细胞,Daudi细胞

K562/Adr KL1201 人白血病阿霉素耐药株 K562/Adr细胞

HL-60/Ad KL1202 人白血病阿霉素耐药株 HL-60/Ad细胞