MML1小鼠肺细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

MML1小鼠肺细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

MML1小鼠肺细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

MML1小鼠肺细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

HCAEC KL0977 人冠状动脉内皮细胞,HCAEC细胞

JRDC068 KL0978 人骨头肉瘤细胞,MG-63细胞, MG-63

U266 KL0979 人骨髓瘤细胞,U266细胞

OPM-2 KL0980 人骨髓瘤细胞,OPM-2细胞

OPM-2-CMV-EGFP KL0981 人骨髓瘤细胞,OPM-2-CMV-EGFP细胞

NCI-H929-CMV-EGFP KL0982 人骨髓瘤细胞,NCI-H929-CMV-EGFP细胞

3T3D KL0983 人骨髓瘤细胞,3T3D细胞

BMSC KL0984 人骨髓间充质干细胞,BMSC细胞

JRDC119 KL0985 人骨肉瘤细胞,U-2 OS细胞, U-2 OS

U-2 OS-EGFP+puro KL0986 人骨肉瘤细胞,U-2 OS-EGFP+puro细胞

SW1353 KL0987 人骨肉瘤细胞,SW1353细胞

SP20 KL0988 人骨肉瘤细胞,SP20细胞

MNNG/HOS Cl KL0989 人骨肉瘤细胞,MNNG/HOS Cl细胞

MG-63 KL0990 人骨肉瘤细胞,MG-63细胞

Human U2OS KL0991 人骨肉瘤细胞,Human U2OS细胞

HOS KL0992 人骨肉瘤细胞,HOS细胞

U-2 OS KL0993 人骨肉瘤细胞, U-2 OS细胞

LGZC137 KL0994 人宫颈肠转移癌细胞,CaSki细胞, CaSki

HeLa229 KL0995 人宫颈癌细胞(HPV-18 永生化细胞) HeLa229细胞

SiHa KL0996 人宫颈癌细胞,SiHa细胞

HeLa-S3 KL0997 人宫颈癌细胞,HeLa-S3细胞

Hela-RFP-puro KL0998 人宫颈癌细胞,Hela-RFP-puro细胞

Hela-Luc KL0999 人宫颈癌细胞,Hela-Luc细胞

Hela P10s-11F KL1000 人宫颈癌细胞,Hela P10s-11F细胞

HeLa 229 KL1001 人宫颈癌细胞,HeLa 229细胞

CaSKi KL1002 人宫颈癌细胞,CaSKi细胞

Hp2/o KL1003 人跟骨髓瘤细胞,Hp2/o细胞

HO-8910PM KL1004 人高转移卵巢癌细胞,HO-8910PM细胞

LM3 KL1005 人高转移肝癌细胞,LM3细胞

HCCLM3 KL1006 人高转移肝癌细胞,HCCLM3细胞

95-D KL1007 人高转移肺癌细胞,95-D细胞