SEPfk小耳猪肾细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

SEPfk小耳猪肾细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

SEPfk小耳猪肾细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

SEPfk小耳猪肾细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

U-87MG KL0784 人脑星形胶质母细胞瘤细胞,U-87MG细胞

U-87MG-EGFP KL0785 人脑星形胶质母细胞瘤 U-87MG-EGFP细胞

U-118 MG KL0786 人脑星形胶质母细胞瘤 U-118 MG细胞

JRDC082 KL0787 人脑星形胶质瘤细胞,U251细胞, U251

H4 KL0788 人脑神经胶质瘤细胞（H4） H4细胞

U-373MG-EGFP KL0789 人脑神经胶质瘤细胞,U-373MG-EGFP细胞

SF767 KL0790 人脑瘤细胞,SF767细胞

SF17 KL0791 人脑瘤细胞,SF17细胞

SF126 KL0792 人脑瘤细胞,SF126细胞

HEB KL0793 人脑胶质细胞株（正常）HEB细胞

HEB KL0794 人脑胶质细胞株 HEB细胞

TG-905 KL0795 人脑胶质母细胞瘤细胞,TG-905细胞

SW038-C2 KL0796 人脑胶质母细胞瘤细胞,SW038-C2细胞

U373 KL0797 人脑胶质瘤细胞系 U373细胞

BT-325 KL0798 人脑多形性胶质瘤细胞,BT-325细胞

HS68 KL0799 人男性正常龟头细胞系 HS68细胞

SGC-7901/VCR KL0800 人耐VCR胃腺癌细胞,SGC-7901/VCR细胞

MeT-5A KL0801 人膜间皮细胞,MeT-5A细胞

JRDC116 KL0802 人膜间皮细胞,CRL-9444细胞, CRL-9444

CRL-9444 MeT-5A KL0803 人膜间皮细胞,CRL-9444 MeT-5A细胞

Pfeiffer KL0804 人弥漫性大细胞淋巴瘤B淋巴细胞,Pfeiffer细胞

CASC091 KL0805 人盲肠腺癌细胞（未分化）Hce-8693细胞, Hce-8693

CRIC049 KL0806 人盲肠未分化癌 HCE-8962细胞, HCE-8962

JRDC034 KL0807 人慢性髓原白血病细胞,K562细胞, K562 

K562 KL0808 人慢性骨髓性白血病细胞系 K562细胞

HCPEpiC KL0809 人脉络丛上皮细胞,HCPEpiC细胞

\ KL0810 人卵巢腺癌细胞

ES-2 KL0811 人卵巢透明细胞癌细胞,ES-2细胞

PA-1 KL0812 人卵巢畸胎瘤细胞,PA-1细胞