MDBK牛肾细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

MDBK牛肾细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

MDBK牛肾细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

MDBK牛肾细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

2V6.11 KL0754 人胚肾细胞,2V6.11细胞

293 KL0755 人胚肾细胞,293细胞

293XL-hTLR9 KL0756 人胚肾细胞,293XL-hTLR9细胞

293TN KL0757 人胚肾细胞,293TN细胞

293-mTLR5 KL0758 人胚肾细胞,293-mTLR5细胞

293-L.P. KL0759 人胚肾细胞,293-L.P.细胞

293FT KL0760 人胚肾细胞,293FT细胞

293ebna KL0761 人胚肾细胞,293ebna细胞

293A KL0762 人胚肾细胞,293A细胞

293 Cells, low passage KL0763 人胚肾细胞,293 Cells, low passage细胞

293 [HEK-293] KL0764 人胚肾细胞,293 [HEK-293]细胞

HKC KL0765 人胚肾上皮细胞,HKC细胞

HK-2C KL0766 人胚肾上皮细胞,HK-2C细胞

GP2-293 KL0767 人胚肾上皮包装细胞,GP2-293细胞

GP2-293Luc KL0768 人胚肾上皮包装细胞,GP2-293Luc细胞

CCC-HEK-1 KL0769 人胚肾二倍体细胞,CCC-HEK-1细胞

QSG-7701 KL0770 人胚肝细胞正常 QSG-7701细胞

CCC-HEL-1 KL0771 人胚肝二倍体细胞,CCC-HEL-1细胞

WI-38 KL0772 人胚肺细胞,WI-38细胞

JRDC045 KL0773 人胚肺细胞,MRC-5细胞, MRC-5

HLF-02 KL0774 人胚肺二倍体细胞,HLF-02细胞

Z-HL16C KL0775 人胚肺成纤维细胞突变癌细胞,Z-HL16C细胞

WI-38 KL0776 人胚肺成纤维细胞,WI-38细胞

MRC-5 KL0777 人胚肺成纤维细胞,MRC-5细胞

MRC-5-EGFP+puro KL0778 人胚肺成纤维细胞,MRC-5-EGFP+puro细胞

HLF KL0779 人胚肺成纤维细胞,HLF细胞

HFL-I KL0780 人胚肺成纤维细胞,HFL-I细胞

HFL1 KL0781 人胚肺成纤维细胞,HFL1细胞

　HELF KL0782 人胚肺成纤维细胞,HELF细胞

CCC-HPF-1 KL0783 人胚肺成纤维细胞,CCC-HPF-1细胞