BHK-21仓鼠肾细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

BHK-21仓鼠肾细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

BHK-21仓鼠肾细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

BHK-21仓鼠肾细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

CASC117 KL0694 人绒毛膜癌细胞,JEG-3细胞, JEG-3

JEG-3/VP16 KL0695 人绒癌细胞耐药株 JEG-3/VP16细胞

JRDC133 KL0696 人绒癌细胞,JEG细胞, JEG 

JEG-3 KL0697 人绒癌细胞,JEG-3细胞

AAV-293 KL0698 人人胚肾细胞,AAV-293细胞

M619 KL0699 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞,M619细胞

JRDC063 KL0700 人前列腺正常细胞,rwpe2细胞, rwpe2

RWPE1 KL0701 人前列腺上皮细胞,RWPE1细胞

PC-3M 2B4 KL0702 人前列腺癌细胞高转移亚系 PC-3M 2B4细胞

VLcop KL0703 人前列腺癌细胞,VLcop细胞

UI-1 KL0704 人前列腺癌细胞,UI-1细胞

PC-3 KL0705 人前列腺癌细胞,PC-3细胞

LNCaP KL0706 人前列腺癌细胞,LNCaP细胞

Lncap KL0707 人前列腺癌细胞,Lncap细胞

LNCAP KL0708 人前列腺癌细胞,LNCAP细胞

LNCaP clone FGC KL0709 人前列腺癌细胞,LNCaP clone FGC细胞

JCA-1 KL0710 人前列腺癌细胞,JCA-1细胞

Human PC-3 KL0711 人前列腺癌细胞,Human PC-3细胞

Human Dul45 KL0712 人前列腺癌细胞,Human Dul45细胞

gpc-1 KL0713 人前列腺癌细胞,gpc-1细胞

DU-145 KL0714 人前列腺癌细胞,DU-145细胞

ALVA KL0715 人前列腺癌细胞,ALVA细胞

9L-E KL0716 人前列腺癌细胞,9L-E细胞

9L-B KL0717 人前列腺癌细胞,9L-B细胞

CASC001 KL0718 人前列腺癌细胞,22RV1细胞, 22RV1

pc-3 KL0719 人前列腺癌 pc-3细胞

CRIC065 KL0720 人前列腺癌 PC-13细胞, PC-13

DU145 KL0721 人前列腺癌 DU145细胞

JRDC066 KL0722 人前列腺 PC-3细胞, PC-3 

CRIC087 KL0723 人脐静脉血管内皮原代细胞,HUVEC细胞, HUVEC