HEL-2人胚肺二倍体细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

HEL-2人胚肺二倍体细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

HEL-2人胚肺二倍体细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

HEL-2人胚肺二倍体细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

U251 KL0505 人星形胶质瘤细胞,U251细胞

LGZC088 KL0506 人小细胞肺癌细胞,NCI-H446细胞, NCI-H446

NCI-H345 KL0507 人小细胞肺癌细胞,NCI-H345细胞

LTEP-sm KL0508 人小细胞肺癌细胞,LTEP-sm细胞

LTEP-P KL0509 人小细胞肺癌细胞,LTEP-P细胞

DMS153 KL0510 人小细胞肺癌细胞,DMS153 细胞

CRIC004 KL0511 人小细胞肺癌 HS77细胞, HS77

H466 KL0512 人小细胞肺癌 H466细胞

HIC KL0513 人小肠癌细胞,HIC细胞

F56 KL0514 人腺癌细胞,F56细胞

ACC-3 KL0515 人涎腺腺样囊性癌细胞,ACC-3细胞

HT-1080 KL0516 人纤维肉瘤细胞,HT-1080细胞

HT-1080 KL0517 人纤维肉瘤 HT-1080细胞

GES-1 KL0518 人胃粘膜细胞,GES-1细胞

SGC-7901 KL0519 人胃腺癌细胞株 SGC-7901细胞

BGC-823 KL0520 人胃腺癌细胞（低分化） BGC-823细胞

SGC-7901 KL0521 人胃腺癌细胞,SGC-7901细胞

NCI-N87 KL0522 人胃腺癌细胞,NCI-N87细胞

MCG803 KL0523 人胃腺癌细胞,MCG803细胞

Human AGS KL0524 人胃腺癌细胞,Human AGS细胞

BGC-823 KL0525 人胃腺癌细胞,BGC-823细胞

CASC028 KL0526 人胃腺癌细胞,AGS细胞, AGS

GES-1 KL0527 人胃上皮细胞,GES-1细胞

MGC-803 KL0528 人胃癌细胞系 MGC-803细胞

HS-746T KL0529 人胃癌细胞系 HS-746T细胞

CASC105 KL0530 人胃癌细胞（未分化）HGC-27细胞, HGC-27

SNU-638 KL0531 人胃癌细胞,SNU-638细胞

SGC7901 KL0532 人胃癌细胞,SGC7901细胞

NUGC-3 KL0533 人胃癌细胞,NUGC-3细胞

NCI-N87 KL0534 人胃癌细胞,NCI-N87细胞

MKN-45 KL0535 人胃癌细胞,MKN-45细胞

MKN-28 KL0536 人胃癌细胞,MKN-28细胞

CASC150 KL0537 人胃癌细胞,MGC80-3细胞, MGC80-3