BOS-2大额牛皮肤成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

BOS-2大额牛皮肤成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

BOS-2大额牛皮肤成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

BOS-2大额牛皮肤成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

编号 中文 英文名称

KLTC-hxbz-156 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H838

KLTC-hxbz-157 人肺小细胞肺癌 NCI-H2227

KLTC-hxbz-158 人肺癌细胞（淋巴结转移） NCI-H292

KLTC-hxbz-159 人肺腺鳞癌细胞 NCI-H596

KLTC-hxbz-160 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H23

KLTC-hxbz-161 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H2087

KLTC-hxbz-162 人肺腺癌细胞 A549

KLTC-hxbz-163 人肺癌细胞 A-427

KLTC-hxbz-164 人肺癌细胞 H125

KLTC-hxbz-165 人肺巨细胞癌 PG

KLTC-hxbz-166 耐DDP肺癌细胞 A549/DDP

KLTC-hxbz-167 人肺扁平上皮癌细胞 QG-56

KLTC-hxbz-168 人高转移肺癌细胞 95-D

KLTC-hxbz-169 人巨细胞性肺癌细胞 801-D

KLTC-hxbz-170 人肺腺癌细胞 SPC-A1

KLTC-hxbz-171 人肺腺癌细胞 LTPEP-a-2

KLTC-hxbz-172 人肺腺癌细胞 LTEP-a-2

KLTC-hxbz-173 人肺腺癌细胞 H1299

KLTC-hxbz-174 人肺鳞癌细胞 SK-MES-1

KLTC-hxbz-175 人肺腺癌细胞（胸膜渗出液） Calu-3

KLTC-hxbz-176 人肺癌细胞系（未分化） Calu-6

KLTC-hxbz-177 人胚肺二倍体细胞 HLF-02

KLTC-hxbz-178 人肺癌细胞系 Tul-1

KLTC-hxbz-179 人胚肺成纤维细胞 HFL-I

KLTC-hxbz-180 人胚肺细胞 MRC-5

KLTC-hxbz-181 人胚肺细胞 WI-38 

KLTC-hxbz-182 人SV－40转化肺成纤维细胞 WI－38AV13

KLTC-hxbz-183 人肺癌亚历山大细胞系 PLC/PRF/5

KLTC-hxbz-184 人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系 PG-LH7

KLTC-hxbz-185 人肺巨细胞癌(PG）的高转移亚系 PG-BE1

KLTC-hxbz-186 人肺腺癌细胞系 PG49

KLTC-hxbz-187 人肺腺癌细胞 GLC-82

编号 中文 英文名称

KLTC-hxbz-188 人肺巨细胞癌细胞 HLAmP

KLTC-hxbz-189 人肺腺癌细胞（转染TK基因的GLC-82细胞） GLC-82-TK