BOS-4婆罗门牛皮肤成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

BOS-4婆罗门牛皮肤成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

BOS-4婆罗门牛皮肤成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

BOS-4婆罗门牛皮肤成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLTC-hxbz-092 人肝癌细胞 HepG-2

KLTC-hxbz-093 人肝癌细胞 HepG2.2.1.5

KLTC-hxbz-094 人肝癌细胞 SMMC-7721

KLTC-hxbz-095 人肝癌细胞 QGY-7701

KLTC-hxbz-096 人肝癌细胞 QGY-7703

KLTC-hxbz-097 人肝癌细胞 Bel-7402

KLTC-hxbz-098 人肝癌细胞 Bel-7404

KLTC-hxbz-099 人肝癌细胞 Bel-7405

KLTC-hxbz-100 人肝癌细胞 Hep3B2.1-7

KLTC-hxbz-101 人肝癌细胞 SK-HEP-1

KLTC-hxbz-102 人肝癌亚力山大细胞 HCCC-9810

KLTC-hxbz-103 人胆囊癌细胞 GBC-SD

KLTC-hxbz-104 正常人肝细胞 L-02

KLTC-hxbz-105 人胚肝细胞正常 QSG-7701

KLTC-hxbz-106 人肝细胞正常 HL-7702

KLTC-hxbz-107 CCL13张氏肝细胞正常 Chang liver

KLTC-hxbz-108 人肝星形细胞正常 LX-2

KLTC-hxbz-109 人肝内胆管上皮细胞 HIBEpiC

KLTC-hxbz-110 人高转移肝癌细胞 LM3

KLTC-hxbz-111 人肝癌细胞系 LM-6

KLTC-hxbz-112 人低转移肝癌细胞 MHCC97-L

KLTC-hxbz-113 人肝癌细胞 HepG2/2-15

KLTC-hxbz-114 人肝癌细胞 9204

KLTC-hxbz-115 人肝癌细胞 HuH-7

KLTC-hxbz-116 人肝癌细胞 FL62891

KLTC-hxbz-117 人胆管细胞型肝癌细胞 HCCC-9810

KLTC-hxbz-118 人肝癌细胞 HCC-9724

KLTC-hxbz-119 人肝癌细胞 HHCC

KLTC-hxbz-120 人肝癌细胞系 Hep-3B

编号 中文 英文名称

KLTC-hxbz-121 表达HBV病毒的人肝细胞 HepG2.2.15

KLTC-hxbz-122 人肝癌细胞 H7402