BOS-5大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

BOS-5大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

BOS-5大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

BOS-5大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLTC-hxbz-058 人结肠癌细胞 Ls-174-T

KLTC-hxbz-059 人结肠癌细胞 LS174T

KLTC-hxbz-060 人结肠癌细胞 CW-2

KLTC-hxbz-061 人结肠癌细胞 RKO

KLTC-hxbz-062 人结肠癌转基因细胞 RKO-AS45-1

KLTC-hxbz-063 人结肠癌转基因细胞 RKO-E6

KLTC-hxbz-064 人大肠癌细胞 CL187/CCL187

KLTC-hxbz-065 人大肠癌细胞 SW116

KLTC-hxbz-066 人大肠癌细胞 PA319

KLTC-hxbz-067 人盲肠腺癌细胞（未分化） Hce-8693

KLTC-hxbz-068 人结直肠腺癌细胞 HCT-15

KLTC-hxbz-069 人结直肠腺癌细胞 LS174T

KLTC-hxbz-070 人结肠腺癌细胞 LS180

KLTC-hxbz-071 人高分化结肠腺癌细胞系 THC-8307

KLTC-hxbz-072 人结直肠腺癌上皮细胞 DLD-1

KLTC-hxbz-073 人小肠癌细胞系 HIC

KLTC-hxbz-074 人结肠癌细胞 HRT-S1

KLTC-hxbz-075 人直肠腺癌细胞系 HRC-99

KLTC-hxbz-076 人*癌细胞 PANC-1

KLTC-hxbz-077 人*癌细胞 CFPAC-1

KLTC-hxbz-078 人*癌细胞 PC-3

KLTC-hxbz-079 人转移*癌细胞 AsPc-1

编号 中文 英文名称

KLTC-hxbz-080 人原位*腺癌细胞 BxPC-3

KLTC-hxbz-081 人*细胞 AR42J

KLTC-hxbz-082 人*癌细胞 MIApaca-2

KLTC-hxbz-083 人*癌细胞 JF-305

KLTC-hxbz-084 人*癌细胞 PC-2

KLTC-hxbz-085 人*癌细胞 SW1990

KLTC-hxbz-086 人*癌细胞 CaPan-Ⅱ/Capan-2

KLTC-hxbz-087 人*癌细胞 CRL

KLTC-hxbz-088 人*癌细胞 SFPAC-1

KLTC-hxbz-089 人胚胎*组织来源细胞 CCC-HPE-2

KLTC-hxbz-090 人*腺泡上皮癌 HPAC

KLTC-hxbz-091 人*腺癌细胞 Panc 10.05