WB-S1水牛皮肤成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

WB-S1水牛皮肤成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

WB-S1水牛皮肤成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

WB-S1水牛皮肤成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL1723 巴氏醋杆菌巴氏亚种 CICC T006

KL1724 阿拉伯糖醇汉逊酵母 ACCC 20205

W256 KL1725 Walker氏癌肉瘤256瘤株 W256细胞

SVP KL1726 VERO衍生株 SVP细胞

HTB-96 KL1727 U-2 OS(骨肉瘤细胞)U-2 OS细胞 U-2 OS

TIB-214 KL1728 T细胞,CTLL-2细胞 CTLL-2

TIB-161 KL1729 T淋巴细胞白血病细胞,HuT78细胞 HuT78

JEG-3-VP16-TNFa KL1730 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞

TIB-152 KL1731 T 淋巴细胞白血病细胞) Jurkat,Clone E6-1细胞 Jurkat,Clone E6-1

hFOB1.19 KL1732 SV40转染人成骨细胞,hFOB1.19细胞

COS-7 KL1733 SV40转化的非洲绿猴肾细胞,COS-7细胞

293T KL1734 SV40永生化的人胚肾上皮细胞,293T细胞

293T/17 KL1735 SV40T转化的人胚肾细胞（亚系） 293T/17细胞

CRL-11372 KL1736 SV40 转染成骨细胞,hFOB 1.19细胞 hFOB 1.19

CRL-1650 KL1737 SV40 转化的非洲绿猴肾细胞, COS-1细胞 COS-1

// KL1738 SRSV转化的3T3细胞) SRSV/3T3细胞 SRSV/3T3

SDBMSC KL1739 SD大鼠骨髓间充质干细胞,SDBMSC细胞

CCL-136 KL1740 RD(恶性胚胎横纹肌瘤细胞) RD细胞 RD

NFS-60 KL1741 NFS-60细胞,NFS-60细胞

mouse N3 KL1742 mouse N3 mouse N3细胞

// KL1743 Mo-MuLv感染的3T3细胞,Mo-MuLv/3T3细胞 Mo-MuLv/3T3

Lewis KL1744 LLC小鼠 Lewis 肺癌细胞,Lewis细胞

LLC KL1745 Leuwis肺癌细胞,LLC细胞

U27 KL1746 KM小鼠子宫颈癌瘤株 U27细胞

B22 KL1747 KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株 B22细胞

LⅡ KL1748 KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株 LⅡ细胞

G422 KL1749 KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株 G422细胞

K562/ADP KL1750 K562耐阿霉素细胞株 K562/ADP细胞

TC-1 KL1751 HPVl6 E6、E7和ras基因共转化的C57BL／C(H-2b)小鼠肺上皮细胞,TC-1细胞

293A KL1752 HEK293,人胚肾上皮细胞,293A细胞

B95-8 KL1753 EB病毒转化的绒猴淋巴细胞,B95-8细胞

// KL1754 EBV 转化的绒猴白细胞,B95-8细胞 B95-8

// KL1755 EB 病毒转化的B 细胞,CGM1细胞 CGM1

Chang liver KL1756 CCL13张氏肝细胞正常 Chang liver细胞

ME KL1757 C57小鼠黑色素瘤瘤株 ME细胞