WB-S2水牛皮肤成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

WB-S2水牛皮肤成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

WB-S2水牛皮肤成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

WB-S2水牛皮肤成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

145-2C11 KL1690 仓鼠/小鼠杂交瘤细胞,145-2C11细胞

Pr-HNV8 KL1691 菜青虫卵巢细胞,Pr-HNV8细胞

KL1692 丙酮丁醇梭菌（丙酮丁醇杆菌） CICC 8011

TC-jcyj0016 KL1693 表皮葡萄球菌 ATCC 12228

CRL-1555 KL1694 表皮癌细胞,A-431细胞 A-431

293FT KL1695 表达SV40T抗原人胚肾上皮细胞,293FT细胞

293ET KL1696 表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞,293ET细胞

HepG2.2.15 KL1697 表达HBV病毒的人肝细胞,HepG2.2.15细胞

TC-jcyj0160 KL1698 变异链球菌

KL1699 变形杆菌 ACCC 11002

Tb 1 Lu KL1700 蝙蝠肺细胞,Tb 1 Lu细胞

SUNE-1亚株-5-8F KL1701 鼻咽癌细胞系 SUNE-1亚株-5-8F细胞

// KL1702 鼻咽癌细胞,CNE细胞 CNE

CNE   KL1703 鼻咽癌 CNE细胞

KL1704 贝酵母 CICC 1408

KL1705 保加利亚乳杆菌 ACCC 10638

HTB-4 KL1706 膀胱移行细胞癌细胞,T24细胞 T24

HTB-9 KL1707 膀胱癌细胞,5637细胞 5637

TC-jcyj0075 KL1708 阪崎肠杆菌

TC-jcyj0176 KL1709 败毒梭菌Clostridium septicum ATCC 12464

CRL-2256 KL1710 白血病细胞,RBL-2H3细胞 RBL-2H3

CCL-219 KL1711 白血病细胞,L1210细胞 L1210

CCL-246 KL1712 白血病细胞,KG-1细胞 KG-1

KL1713 白色噬琼胶菌 NBRC102603

KL1714 白色葡萄球菌 ATCC8799

KL1715 白色念珠菌 CMCC(F) 98001

TC-jcyj0011 KL1716 白色假丝酵母/白色念球菌 ATCC 10231

KL1717 白色假丝酵母 CMCC 98001

KL1718 白球拟酵母 CICC 1040

KL1719 白浅灰链霉菌 ACCC 40001

SCF KL1720 白鲢尾鳍细胞,SCF细胞

JEG-3/VP16-IL-2 KL1721 白介素-2转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3/VP16-IL-2细胞

KL1722 白僵菌 ACCC 30006