WB-S3水牛皮肤成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

WB-S3水牛皮肤成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

WB-S3水牛皮肤成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

WB-S3水牛皮肤成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

TC-jcyj0056 KL1655 串珠镰刀菌

KL1656 串珠镰孢 ATCC52539

TC-jcyj0092 KL1657 出芽短梗霉

TC-jcyj0074 KL1658 出血性大肠埃希氏菌

KL1659 臭曲霉 ACCC 30126

TC-jcyj0167 KL1660 迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌 ATCC 43055

CRL-9078 KL1661 成纤维细胞,PA317细胞 PA317

CCL-1 KL1662 成纤维细胞,L929细胞 L929

HTB-85 KL1663 成骨肉瘤细胞,Saos-2细胞 Saos-2

KL1664 潮湿纤维单胞菌 ATCC491

KL1665 肠炎沙门氏菌肠炎亚种 ATCC14028

TC-jcyj0040 KL1666 肠炎沙门氏菌

KL1667 肠埃希氏菌 CMCC(B) 44103

TC-jcyj0063 KL1668 长双歧杆菌

KL1669 长根菇（长根奥德磨） ACCC 50053

MLA-144 KL1670 长臂猿淋巴瘤 MLA-144细胞

CCL-35 KL1671 长鼻袋鼠肾细胞,Pt K1 (NBL-3)细胞 Pt K1 (NBL-3)

KL1672 产朊假丝酵母 ATCC22023

TC-jcyj0084 KL1673 产气荚膜梭菌 ATCC 13124

TC-jcyj0147 KL1674 产气肠杆菌

KL1675 产黄纤维单胞菌 ACCC 11055

B95-8 KL1676 产EBV的绒猴白细胞,B95-8细胞

CIK KL1677 草鱼*细胞,CIK细胞

L8824 KL1678 草鱼*细胞,L8824细胞

BHK-21 KL1679 仓鼠肾成纤维细胞,BHK-21细胞

CASC037 KL1680 仓鼠肾成纤维细胞,BHK-21 [C-13]细胞, BHK-21 [C-13]

CASC061 KL1681 仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1细胞, CHO-K1

CHO-K1-EGFP KL1682 仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1-EGFP细胞

CASC060 KL1683 仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 CHO/dhFr细胞, CHO/dhFr

CHO/dhFr- KL1684 仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 CHO/dhFr-细胞

CASC130 KL1685 仓鼠卵巢细胞,Lec1细胞, Lec1

CHO KL1686 仓鼠卵巢细胞,CHO细胞

V79 KL1687 仓鼠肺细胞,V79细胞

R1610 KL1688 仓鼠肺细胞,R1610细胞

CHL KL1689 仓鼠肺细胞,CHL细胞