CCRF-SD人外周血淋巴细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

CCRF-SD人外周血淋巴细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

CCRF-SD人外周血淋巴细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

CCRF-SD人外周血淋巴细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

T47D KL0647 人乳腺导管癌细胞,T47D细胞

MDA-MB-453 KL0648 人乳腺导管癌细胞,MDA-MB-453细胞

HCC38 KL0649 人乳腺导管癌细胞,HCC38细胞

JRDC093 KL0650 人乳腺导管癌细胞,BT474细胞, BT474

BT-474 [BT474] KL0651 人乳腺导管癌细胞,BT-474 [BT474]细胞

JRDC103 KL0652 人乳腺导管癌 MDA-MB-435S细胞, MDA-MB-435S

1590 KL0653 人乳腺癌细胞系1590细胞

MCF-7/ADR KL0654 人乳腺癌细胞（耐药） MCF-7/ADR细胞

MCF-7/ADR KL0655 人乳腺癌细胞(耐阿霉素) MCF-7/ADR细胞

ZR75-30 KL0656 人乳腺癌细胞,ZR75-30细胞

ZR75-1 KL0657 人乳腺癌细胞,ZR75-1细胞

SK-BR-3 KL0658 人乳腺癌细胞,SK-BR-3细胞

SKBr-2HL KL0659 人乳腺癌细胞,SKBr-2HL细胞

SK-BG-3 KL0660 人乳腺癌细胞,SK-BG-3细胞

MX-1 KL0661 人乳腺癌细胞,MX-1细胞

MDA-MB-468 KL0662 人乳腺癌细胞,MDA-MB-468细胞

MDA-MB-453 KL0663 人乳腺癌细胞,MDA-MB-453细胞

MDA-MB-436 KL0664 人乳腺癌细胞,MDA-MB-436细胞

MDA-MB-435S KL0665 人乳腺癌细胞,MDA-MB-435S细胞

MDA-MB-415 KL0666 人乳腺癌细胞,MDA-MB-415细胞

MDA-MB-361 KL0667 人乳腺癌细胞,MDA-MB-361细胞

MDA-MB-231 KL0668 人乳腺癌细胞,MDA-MB-231细胞

MCF-7 KL0669 人乳腺癌细胞,MCF-7细胞

MCF7 KL0670 人乳腺癌细胞,MCF7细胞

MCF-7-EGFP-puro KL0671 人乳腺癌细胞,MCF-7-EGFP-puro细胞

MCF-7B KL0672 人乳腺癌细胞,MCF-7B细胞

MCF-7/ER36 KL0673 人乳腺癌细胞,MCF-7/ER36细胞

MCF-7(OLD) KL0674 人乳腺癌细胞,MCF-7(OLD)细胞

MCF-7(NEW) KL0675 人乳腺癌细胞,MCF-7(NEW)细胞

MCF7 [MCF-7] KL0676 人乳腺癌细胞,MCF7 [MCF-7]细胞

MB-271 KL0677 人乳腺癌细胞,MB-271细胞

M453 KL0678 人乳腺癌细胞,M453细胞

LCC1 KL0679 人乳腺癌细胞,LCC1细胞