M2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

M2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

M2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

M2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

M，BE(2)-M17 KL0616 人神经母细胞瘤细胞,M，BE(2)-M17细胞

CASC114 KL0617 人神经母细胞瘤细胞,IMR-32细胞, IMR-32

BE(2)-M17 KL0618 人神经母细胞瘤细胞,BE(2)-M17细胞

U251 KL0619 人神经胶质细胞瘤细胞,U251细胞

BT-325 KL0620 人神经胶质瘤细胞,BT-325细胞

SF-268 KL0621 人神经癌细胞,SF-268细胞

TSCCA KL0622 人舌鳞癌细胞系 TSCCA细胞

TCA8113 KL0623 人舌鳞癌细胞,TCA8113细胞

Tca-8113-EGFP KL0624 人舌鳞癌细胞,Tca-8113-EGFP细胞

SCC-9 KL0625 人舌鳞癌细胞,SCC-9细胞

SCC-25 KL0626 人舌鳞癌细胞,SCC-25细胞

CAL-27 KL0627 人舌鳞癌细胞,CAL-27细胞

CAL 27-EGFP KL0628 人舌鳞癌细胞,CAL 27-EGFP细胞

CAL 27-EGFP-puro KL0629 人舌鳞癌细胞,CAL 27-EGFP-puro细胞

Tca8113-P60 KL0630 人舌癌细胞系 Tca8113-P60细胞

Tca-8113 KL0631 人舌癌细胞,Tca-8113细胞

T6 KL0632 人舌癌细胞,T6细胞

JRDC080 KL0633 人舌癌细胞,SCC-25细胞, SCC-25 

HOPC-os KL0634 人少突胶质前体细胞-悬浮生长 HOPC-os细胞

SW 1353 KL0635 人软骨肉瘤细胞,SW 1353细胞

SK-BR-3 KL0636 人乳腺腺癌细胞,SK-BR-3细胞

MDA-MB-436 KL0637 人乳腺腺癌细胞,MDA-MB-436细胞

CASC140 KL0638 人乳腺腺癌细胞,MDA-MB-415细胞, MDA-MB-415

MDA-MB-231 KL0639 人乳腺腺癌 MDA-MB-231细胞

HBL-100 KL0640 人乳腺细胞,HBL-100细胞

BT549 KL0641 人乳腺细胞,BT549细胞

CCD-1095Sk KL0642 人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞,CCD-1095Sk细胞

T-47D KL0643 人乳腺管癌细胞,T-47D细胞

CASC042 KL0644 人乳腺管癌细胞,BT-549细胞, BT-549

UACC812 KL0645 人乳腺导管瘤细胞,UACC812细胞

BT-474 KL0646 人乳腺导管瘤细胞,BT-474细胞