APRE-19人视网膜上皮细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

APRE-19人视网膜上皮细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

APRE-19人视网膜上皮细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

APRE-19人视网膜上皮细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

HPAC KL0484 人*癌细胞,HPAC细胞

CRL KL0485 人*癌细胞,CRL细胞

CFPAC-1 KL0486 人*癌细胞,CFPAC-1细胞

CaPan-Ⅱ/Capan-2 KL0487 人*癌细胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2细胞

Capan2 KL0488 人*癌细胞,Capan2细胞

SW1990 KL0489 人*癌 SW1990细胞

PANC-1 KL0490 人*癌 PANC-1细胞

CASC265 KL0491 人羊膜细胞,WISH细胞, WISH

HA KL0492 人羊膜细胞,HA细胞

OCM-1 KL0493 人眼脉络黑色素瘤细胞,OCM-1细胞

MuM－2C   KL0494 人眼脉络黑色素瘤细胞,MuM－2C细胞

MuM－2B KL0495 人眼脉络黑色素瘤细胞,MuM－2B细胞

C918 KL0496 人眼脉络黑色素瘤细胞,C918细胞

JRDC102 KL0497 人咽鳞癌细胞,FaDu细胞, FaDu

TF-1 KL0498 人血液白血病细胞,TF-1细胞

 T/G KL0499 人血管平滑肌 T/G细胞

VE KL0500 人血管内皮细胞,VE细胞

EC-304 KL0501 人血管内皮细胞,EC-304细胞

HSC KL0502 人雪旺细胞,HSC细胞

 143TK KL0503 人胸腺激酶缺陷性细胞系 143TK细胞

SMC-1 KL0504 人胸膜瘤细胞,SMC-1细胞

U251 KL0505 人星形胶质瘤细胞,U251细胞

LGZC088 KL0506 人小细胞肺癌细胞,NCI-H446细胞, NCI-H446

NCI-H345 KL0507 人小细胞肺癌细胞,NCI-H345细胞

LTEP-sm KL0508 人小细胞肺癌细胞,LTEP-sm细胞

LTEP-P KL0509 人小细胞肺癌细胞,LTEP-P细胞

DMS153 KL0510 人小细胞肺癌细胞,DMS153 细胞

CRIC004 KL0511 人小细胞肺癌 HS77细胞, HS77

H466 KL0512 人小细胞肺癌 H466细胞

HIC KL0513 人小肠癌细胞,HIC细胞

F56 KL0514 人腺癌细胞,F56细胞

ACC-3 KL0515 人涎腺腺样囊性癌细胞,ACC-3细胞

HT-1080 KL0516 人纤维肉瘤细胞,HT-1080细胞

HT-1080 KL0517 人纤维肉瘤 HT-1080细胞