U266B1人外周血淋巴细胞系完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

U266B1人外周血淋巴细胞系冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

U266B1人外周血淋巴细胞系复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

U266B1人外周血淋巴细胞系复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

JRDC081 KL0418 人组织细胞淋巴瘤细胞,U937细胞, U937 

KLE KL0419 人子宫内膜腺癌细胞,KLE细胞

JEC KL0420 人子宫内膜腺癌细胞,JEC细胞

HEC-A-1 KL0421 人子宫内膜腺癌细胞,HEC-A-1细胞

HEC-1-B KL0422 人子宫内膜腺癌细胞,HEC-1-B细胞

HEC-1-A KL0423 人子宫内膜腺癌细胞,HEC-1-A细胞

LGZC139 KL0424 人子宫内膜腺癌细胞,AN3CA细胞, AN3CA

CASC213 KL0425 人子宫内膜癌细胞,RL95-2细胞, RL95-2

ISK （Ishikawa） KL0426 人子宫内膜癌细胞,ISK （Ishikawa细胞

Ishikeuva KL0427 人子宫内膜癌细胞,Ishikeuva细胞

HCC 94 KL0428 人子宫鳞癌细胞（高分化）HCC 94细胞

JRDC120 KL0429 人子宫颈鳞癌细胞,SiHa细胞, SiHa

CASC157 KL0430 人子宫颈表皮癌细胞,MS751细胞, MS751

ME-180 KL0431 人子宫颈表皮癌细胞,ME-180细胞

C-33A KL0432 人子宫颈癌细胞,C-33A细胞

HTR-8 KL0433 人滋养细胞,HTR-8细胞

AsPC- KL0434 人转移*腺癌细胞,AsPC-细胞

Aspc-1 KL0435 人转移*癌细胞,Aspc-1细胞

CRL-1999 KL0436 人主动脉血管平滑肌细胞,T/G HA-VSMC细胞 T/G HA-VSMC

HA-VSMC KL0437 人主动脉血管平滑肌细胞,HA-VSMC细胞

HRC-99 KL0438 人直肠腺癌细胞系 HRC-99细胞

HBE KL0439 人支气管上皮细胞,HBE细胞

BEAS-2B KL0440 人支气管上皮细胞,BEAS-2B细胞

JRDC114 KL0441 人支气管上皮细胞,16HBE细胞, 16HBE

MDA-kb2 KL0442 人正常乳腺细胞,MDA-kb2细胞

LGZC014 KL0443 人正常乳腺上皮细胞,MCF-10A细胞, MCF-10A

human MCF10A KL0444 人正常乳腺上皮细胞,human MCF10A细胞

RWPE-2 KL0445 人正常前列腺上皮细胞,RWPE-2细胞

RWPE-1 KL0446 人正常前列腺上皮细胞,RWPE-1细胞

WPMY-1 KL0447 人正常前列腺基质永生化细胞,WPMY-1细胞

JRDC049 KL0448 人正常皮肤细胞,Hacat细胞, Hacat

LGZC005 KL0449 人正常肝细胞,LO2细胞, LO2

human QSG-7701 KL0450 人正常肝细胞,human QSG-7701细胞

human L02 KL0451 人正常肝细胞,human L02细胞