YTS191.1.2抗鼠CD4单克隆细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

YTS191.1.2抗鼠CD4单克隆细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

YTS191.1.2抗鼠CD4单克隆细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

YTS191.1.2抗鼠CD4单克隆细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

HTB-11 KL0387 神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞 SK-N-SH

CRL-2266 KL0388 神经母细胞瘤细胞,SH-SY5Y细胞 SH-SY5Y

SHG-44 KL0389 神经胶质瘤细胞, SHG-44细胞

CRT KL0390 神经胶质瘤细胞, CRT细胞

KL0391 深红酵母 ACCC 20252

GNM KL0392 上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌 GNM细胞

KL0393 伤寒沙门氏菌 CMCC(B) 50071

KL0394 珊瑚色诺卡氏菌 ACCC 40100

KL0395 珊瑚链霉菌 ATCC23901

KL0396 沙链霉菌 ATCC25488

KL0397 散鳞镜鲤尾鳍细胞

KL0398 瑞士乳杆菌 CICC 6024

CRL-1804 KL0399 乳腺肿瘤细胞,C127细胞 C127

HTB-30 KL0400 乳腺腺癌细胞,SK-BR-3细胞 SK-BR-3

HTB-125 KL0401 乳腺细胞,Hs 578Bs细胞 Hs 578Bs

HTB-133 KL0402 乳腺管癌细胞,T-47D细胞 T-47D

HTB-122 KL0403 乳腺管癌细胞,BT549细胞 BT549

JRDC056 KL0404 乳腺管癌 T47-D细胞, T47-D

CRL-1504 KL0405 乳腺癌细胞,ZR-75-30细胞 ZR-75-30

CRL-1500 KL0406 乳腺癌细胞,ZR-75-1细胞 ZR-75-1

// KL0407 乳腺癌细胞,SHZ-88细胞 SHZ-88

HTB-132 KL0408 乳腺癌细胞,MDA-MB-468细胞 MDA-MB-468

HTB-131 KL0409 乳腺癌细胞,MDA-MB-453细胞 MDA-MB-453

HTB-129 KL0410 乳腺癌细胞,MDA-MB-435S细胞 MDA-MB-435S

HTB-26 KL0411 乳腺癌细胞,MDA-MB-231细胞 MDA-MB-231

HTB-22 KL0412 乳腺癌细胞,MCF7细胞 MCF7

HTB-126 KL0413 乳腺癌细胞,Hs 578T细胞 Hs 578T

// KL0414 乳腺癌细胞,Bcap-37细胞 Bcap-37

KL0415 乳链球菌 CICC 6016

TC-jcyj0175 KL0416 溶组织梭菌Clostridium histolyticum ATCC 19401

JRDC047 KL0417 绒猴EBV转化的白细胞,B95-8细胞, B95-8