293F人胚肾细胞-F克隆完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

293F人胚肾细胞-F克隆冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

293F人胚肾细胞-F克隆复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

293F人胚肾细胞-F克隆复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

McCoy KL0255 小鼠成纤维细胞系 McCoy细胞

NIH-3T3 KL0256 小鼠成纤维细胞,NIH-3T3细胞

NCTC clone 929 KL0257 小鼠成纤维细胞,NCTC clone 929细胞

L929 KL0258 小鼠成纤维细胞,L929细胞

L929-EGFP-puro KL0259 小鼠成纤维细胞,L929-EGFP-puro细胞

C3H 10T1/2 2A6 KL0260 小鼠成纤维细胞,C3H 10T1/2 2A6细胞

3T3 KL0261 小鼠成纤维细胞,3T3细胞

3T3NIH KL0262 小鼠成纤维细胞,3T3NIH细胞

JRDC122 KL0263 小鼠成肌细胞,C2C12细胞, C2C12

MC3T3-E1 KL0264 小鼠成骨细胞系 MC3T3-E1细胞

LGZC183 KL0265 小鼠成骨细胞,2T3细胞, 2T3

JB6 Cl 30-7b KL0266 小鼠表皮细胞,JB6 Cl 30-7b细胞

NFS-60 KL0267 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性 NFS-60细胞

P388 KL0268 小鼠白血病细胞,P388细胞

M1 KL0269 小鼠白血病细胞,M1细胞

JRDC046 KL0270 小鼠白血病细胞,L1210细胞, L1210

C3 KL0271 小鼠白血病细胞,C3细胞

CASC129 KL0272 小鼠白血病克隆细胞系 L6565细胞, L6565

L1210 KL0273 小鼠白血病 L1210细胞

S180 KL0274 小鼠艾氏腹水瘤细胞,TCM15S180细胞

LGZC205 KL0275 小鼠艾氏腹水瘤细胞,ECA细胞, ECA

RIN-m5F KL0276 小鼠β胰岛素瘤细胞,RIN-m5F细胞

PK136 KL0277 小鼠X小鼠 PK136细胞

Cyc-Tag(S49) KL0278 小鼠T淋巴细胞瘤细胞,Cyc-Tag(S49)细胞

Cl.Ly1+2-/9 KL0279 小鼠T淋巴细胞,Cl.Ly1+2-/9细胞

SRSV/3T3 KL0280 小鼠SRSV转化的3T3细胞,SRSV/3T3细胞

Mo-MuLV/3T3 KL0281 小鼠Mo-MuLv感染的3T3细胞,Mo-MuLV/3T3细胞

LLC-RFP-puro KL0282 小鼠Lewis肺癌细胞,LLC-RFP-puro细胞

LLT KL0283 小鼠Lewis肺癌瘤株 LLT细胞

// KL0284 小鼠L6565白血病克隆细胞系 L6565细胞 L6565

KL0285 小鼠IL-3依赖性32D细胞

W6/32 KL0286 小鼠B细胞杂交瘤细胞,W6/32细胞

SH3 KL0287 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞,SH3细胞

WEHI 231 KL0288 小鼠B淋巴细胞,WEHI 231细胞