HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纤维细胞（HNP抗性）完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纤维细胞（HNP抗性）冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纤维细胞（HNP抗性）复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纤维细胞（HNP抗性）复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

CASC187 KL0224 小鼠骨髓瘤细胞 P3X63Ag8.653

SP2/MIL-6 KL0225 小鼠骨髓瘤B淋巴细胞,SP2/MIL-6细胞

P9 KL0226 小鼠骨髓基质细胞,P9细胞

P9-EGFP-puro KL0227 小鼠骨髓基质细胞,P9-EGFP-puro细胞

OP9 KL0228 小鼠骨髓基质细胞,OP9细胞

CASC121 KL0229 小鼠骨肉瘤成骨细胞,K7M2-WT细胞, K7M2-WT

CASC151 KL0230 小鼠睾丸间质细胞瘤细胞,MLTC-1细胞, MLTC-1

CASC250 KL0231 小鼠睾丸间质细胞,TM3细胞, TM3

S-180 KL0232 小鼠肛门肉瘤细胞,S-180细胞

AML12 KL0233 小鼠肝细胞,AML12细胞

Hepa 1-6 KL0234 小鼠肝癌细胞,Hepa 1-6细胞

H22 KL0235 小鼠肝癌细胞,H22细胞

SAC-II C3 KL0236 小鼠腹水瘤细胞,SAC-II C3细胞

SAC-II B2 KL0237 小鼠腹水瘤细胞,SAC-II B2细胞

JRDC070 KL0238 小鼠腹水瘤细胞,S-180细胞, S-180

LA795 KL0239 小鼠肺腺癌细胞系 LA795细胞

L929 KL0240 小鼠肺成纤维细胞,L929细胞

LLC KL0241 小鼠肺癌细胞,LLC细胞

LLC1[LL/2] KL0242 小鼠肺癌细胞,LLC1[LL/2]细胞

LGZC198 KL0243 小鼠肺癌细胞,Lewis细胞, Lewis

P815 KL0244 小鼠肥大细胞瘤细胞,P815细胞

JRDC079 KL0245 小鼠肥大细胞,P815细胞, P815

Raw-Blue KL0246 小鼠单核细胞白血病细胞,Raw-Blue细胞

RAW264.7 KL0247 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,RAW264.7细胞

J774A.1 KL0248 小鼠单核巨噬细胞,J774A.1细胞

CT-26.WT KL0249 小鼠大肠癌细胞,CT-26.WT细胞

MPC KL0250 小鼠垂体细胞,MPC细胞

AtT-20 KL0251 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素) AtT-20细胞

GT1-1 KL0252 小鼠垂体瘤细胞,GT1-1细胞

AtT-20 KL0253 小鼠垂体瘤细胞,AtT-20细胞

JRDC086 KL0254 小鼠垂体瘤 ATT-20细胞, ATT-20