RMC大鼠肾系膜细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

RMC大鼠肾系膜细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

RMC大鼠肾系膜细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

RMC大鼠肾系膜细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL0037 中华根霉 ACCC 30301

CRL-1657 KL0038 中国仓鼠体细胞,R 1610(细胞 R 1610(

CHO/dhFr- KL0039 中国仓鼠肾细胞(二氢叶酸还原酶缺陷型) CHO/dhFr-细胞

CTLA4 Ig-24 KL0040 中国仓鼠卵巢细胞,CTLA4 Ig-24细胞

JRDC083 KL0041 中国仓鼠卵巢细胞,CHO细胞, CHO

V79 KL0042 中国仓鼠肺细胞,V79细胞

CCL-93 KL0043 中国仓鼠肺细胞,V79-4细胞 V79-4

CHL KL0044 中国仓鼠肺细胞,CHL细胞

CRL-1935 KL0045 中国仓鼠肺细胞,CHL/IU [ CHL-11 ]细胞 CHL/IU [ CHL-11 ]

CRL-9096 KL0046 中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞,CHO/dhFr-细胞 CHO/dhFr-

CHO-K1 KL0047 中国仓鼠仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1细胞

R1610 KL0048 中国仓鼠仓鼠肺细胞,R1610细胞

CASC154 KL0049 中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤 MR1细胞, MR1

TC-jcyj0042 KL0050 致病性大肠埃希氏菌

TC-jcyj0072 KL0051 植物乳杆菌

TM4 KL0052 正常小鼠睾丸Sertoli细胞,TM4细胞

TM3 KL0053 正常小鼠睾丸Leydig细胞,TM3细胞

L-02 KL0054 正常人肝细胞,L-02细胞

NRK KL0055 正常大鼠肾细胞,NRK细胞

// KL0056 整合SV40 基因的乳腺上皮细胞,HBL-100细胞 HBL-100

TC-jcyj0048 KL0057 赭曲霉

TC-jcyj0095 KL0058 赭绿青霉

KL0059 沼泽红假单胞菌 DSM5859

CCL-13 KL0060 张氏肝细胞,HeLa [ Chang Liver ]细胞 HeLa [ Chang Liver ]

TC-jcyj0039 KL0061 粘质沙雷氏菌

TC-jcyj0150 KL0062 粘质沙雷伯氏菌

KL0063 粘红酵母 ACCC 20030

MEF KL0064 早代小鼠胚胎成纤维细胞,MEF细胞

A-kata(+) KL0065 暂不提供 A-kata(+)细胞

TC-jcyj0036 KL0066 杂色曲霉

B6YH4 KL0067 杂交瘤细胞枝原体阳性 B6YH4细胞

OKT 11 KL0068 杂交瘤细胞抗CD2 OKT 11细胞

35.1 KL0069 杂交瘤细胞抗CD2 35.1细胞