2011104L豚鼠肺成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

2011104L豚鼠肺成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

2011104L豚鼠肺成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

2011104L豚鼠肺成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLC3859 M199H   M199H  

KLC3860 DMEM DMEM 

KLC3861 DMEM DMEM

KLC3862 DMEM   DMEM  

KLC3863 DMEM DMEM 

KLC3864 DMEM   DMEM  

KLC3865 DMEM-prf DMEM-prf

KLC3866 Ham's F-10 Ham's F-10

KLC3867 Ham's F-12 Ham's F-12

KLC3868 DMEM/F-12 DMEM/F-12

KLC3869 DMEM/F-12 DMEM/F-12 

KLC3870 RPMI 1640 RPMI 1640

KLC3871 RPMI 1640 RPMI 1640

KLC3872 IMDM   IMDM  

KLC3878 重组人干细胞因子 rhSCF

KLC3879 重组人粒细胞集落刺激因子 rhG-CSF

KLC3880 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 rhGM-CSF

KLC3881 重组人巨噬细胞集落刺激因子 rhM-CSF

KLC3882 重组人肿瘤坏死因子-α rhTNF-α

KLC3883 重组人肿瘤坏死因子-α,His rhTNF-α-His

KLC3884 重组人肿瘤坏死因子-αVariant rhTNF-α Vari

KLC3885 重组人B细胞活化因子 rhBAF

KLC3886 重组人抑瘤素-M rhOSM

KLC3887 重组人抑瘤素-M209a.a. rhOSM 209a.a.

KLC3888 重组人血管抑素K1-3 rhAK1-3

KLC3889 重组人血管内皮抑素 rhEndostatin

KLC3890 重组人成纤维细胞生长因子--酸性 rhaFGF

KLC3891 重组人成纤维细胞生长因子--碱性 rhbFGF

KLC3892 重组人角质细胞生长因子-1 rhKGF-1

KLC3893 重组人成纤维细胞生长因子-9 rhFGF-9

KLC3894 重组人角质细胞生长因子-2 rhKGF-2

KLC3895 重组人成纤维细胞生长因子-19 rhFGF-19

KLC3896 重组人成纤维细胞生长因子-21 rhFGF-21

KLC3897 重组人IGF-I rhIGF-I

KLC3898 重组人 DES1-3/ 胰岛样生长因子 -1 rHuDES1-3/IGF1