2011124L北松鼠肺成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

2011124L北松鼠肺成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

2011124L北松鼠肺成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

2011124L北松鼠肺成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLC3680小鼠淋巴成纤维细胞MLF

KLC3681小鼠肾小管上皮细胞MRTEpiC

KLC3682小鼠肾系膜细胞MRMC

KLC3683小鼠肝星状细胞MHSteC

KLC3684小鼠心肌细胞MCM

KLC3685小鼠心脏成纤维细胞MCF

KLC3686小鼠骨髓间充质干细胞MMSC-bm

KLC3687小鼠胚胎成纤维细胞MEF

KLC3689

KLC3690CD57BL/6小鼠细胞

KLC3691小鼠脑膜细胞MMC

KLC3692小鼠脑脊神经元MN-r

KLC3693小鼠皮质神经元MN-c

KLC3694小鼠颗粒细胞MGC

KLC3695小鼠海马趾神经元MN-h

KLC3696小鼠腹脊髓神经元MN-vsc

KLC3697小鼠背脊髓神经元MN-dsc]

KLC3698小鼠腹脊髓神经元MN-vsc

KLC3699小鼠雪旺细胞MSC

KLC3700小鼠星形胶质细胞MA

KLC3701小鼠小脑星形胶质细胞MA-c

KLC3702小鼠海马趾星形胶质细胞MA-h

KLC3703小鼠脊髓星形胶质细胞MA-sc

KLC3704小鼠小胶质细胞MM

KLC3705小鼠巨噬细胞MMa-bm

KLC3706小鼠淋巴成纤维细胞MLF

KLC3707小鼠唾腺成纤维细胞MSGF

KLC3708小鼠肺成纤维细胞MPF

KLC3709小鼠肾小管上皮细胞MRTEpiC

KLC3710小鼠肾系膜细胞MRMC

KLC3711小鼠心肌细胞MCM

KLC3712小鼠心脏成纤维细胞MCF

KLC3713小鼠骨髓间充质干细胞MMSC-bm

KLC3714小鼠胚胎成纤维细胞MEF-mt