C57/B6-L小鼠肺成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

C57/B6-L小鼠肺成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

C57/B6-L小鼠肺成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

C57/B6-L小鼠肺成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL0703 BPE 牛脑垂体提取物 Bovine Pituitary Extract 25 mg

KL0713 BPE 牛脑垂体提取物 Bovine Pituitary Extract 100 mg

KL0803 ITS 胰岛素铁硒传递蛋白 Insulin-Transferrin-Selenium, 100x 10 ml

KL0813 L-Glu 左旋谷氨酰胺溶液 L-Glutamine Solution, 200 mM 100 ml

KL0823 NEAA 100X非必需氨基酸 100X Non-Essential Amino Acids 100ml

KL0833 HGL PCR 人胚层检测试剂盒 Human Germ Layer Detection Kit 50 reactions 

KL0843 Ored 油红O染色试剂盒 Oil Red O Staining Kit 100 ml 

KL5803 StemDS 人胚胎干细胞分离液 StemDS Human Embryonic Stem Cell Dissociation Solution 100 ml 

KL8248 BPF 牛血浆纤维粘连蛋白 Bovine Plasma Fibronectin 1 mg

KL8488 HCF 人细胞纤连蛋白 Human Cellular Fibronectin 100 μg

KL8538 BPV 牛血浆玻连蛋白 Bovine Plasma Vitronectin 100 μg

"KLHY-01

" rHSA 重组人血清白蛋白 "Recombinant Human Serum Albumin

" 1g

其他细胞外基质

KL8248 BPF 牛血浆纤维粘连蛋白 Bovine Plasma Fibronectin 1 mg

KL8188 CCCSCK 胶原I-细胞培养表面包被试剂盒 Collage I-Cell Culture Surface Coating Kit 10 mg

KL0403 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 1 mg/ml 1 ml

KL0413 PLL 多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 10 mg/ml 1 ml

人类胚胎干细胞/诱导多能干细胞

KL5801 STEMium 人胚胎干细胞无血清培养基 Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium 500 ml

KL5811 STEMium-XF 无异种人胚胎干细胞生长培养基 Xeno-free Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium 500 ml

KL5821 STEMium-ACF 无动物成分的人胚胎干细胞生长培养基 Animal Component-free Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium 500 ml