C57/B6-SPL小鼠*成纤维样细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

C57/B6-SPL小鼠*成纤维样细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

C57/B6-SPL小鼠*成纤维样细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

C57/B6-SPL小鼠*成纤维样细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL5252 HGS 肝细胞生长因子 Hepatocyte Growth Supplement 5 ml

KL5352 SteCGS 星形细胞生长因子 Stellate Cell Growth Supplement 5 ml

KL5852 StemGS   人胚胎干细胞生长因子 50X StemGS Human Embryonic Stem Cell Growth Supplement 50X 10 ml

KL5862 StemGS-XF   无异种多功能干细胞生长因子  50X Xenofree Human Pluripotent Stem Cell Growth Supplement 50X 10 ml

KL6252 CMGS 心肌细胞生长因子 Cardiac Myocyte Growth Supplement 5 ml

KL6552 CEpiCGS 角膜上皮细胞生长因子 Corneal Epithelial Cell Growth Supplement 5 ml

KL7152 TGS 滋养层细胞生长因子 Trophoblast Growth Supplement 5 ml

KL7232 PAdDS 前脂肪细胞分化生长因子 Preadipocyte Differentiation Supplement

KL7252 PAGS 前脂肪细胞生长因子 Preadipocyte Growth Supplement 5 ml

KL7262 AdGS 脂肪细胞生长因子 Adipocyte Growth Supplement 5 ml

KL7352 OEpiCGS 卵巢上皮细胞生长因子 Ovarian Epithelial Cell Growth Supplement 5 ml

KL7532 MODS 间充质干细胞成骨分化生长因子 Mesenchymal Stem Cell Osteogenic Differentiation supplement 5 ml

KL7542 MADS 间充质干细胞脂肪分化生长因子 Mesenchymal Stem Cell Adipogenic Differentiation supplement 5 ml

KL7552 MSCGS 间充质干细胞生长因子 Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement 5 ml

KL7562 MSCGS-sf 间充质干细胞生长因子 Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement-serum free 5 ml

KL7572 MSCGS-acf 间充质干细胞生长因子-无动物组分 Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement-animal component free 5 ml

KL7582 MCDS 间充质干细胞软骨分化生长因子 Mesenchymal Stem Cell Chondrogenic Differentiation Supplement 5 ml

KL7652 MEpiCGS 乳腺上皮细胞生长因子   Mammary Epithelial Cell Growth Supplement 5 ml