SSf-aSuperSpodopterafrugiperdaa秋行军虫卵巢细胞Sf9克隆株完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

SSf-aSuperSpodopterafrugiperdaa秋行军虫卵巢细胞Sf9克隆株冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

SSf-aSuperSpodopterafrugiperdaa秋行军虫卵巢细胞Sf9克隆株复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

SSf-aSuperSpodopterafrugiperdaa秋行军虫卵巢细胞Sf9克隆株复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

胎盘细胞系统

KL7100 HVCEC 人绒毛膜毛细血管内皮细胞 Human Villus Capillary Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL7110 HAmEpiC 人羊膜上皮细胞 Human Amniotic Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL7120 HVT 人绒毛膜滋养层细胞 Human Villous Trophoblasts 1 x 10^6 cells/vial

KL7130 HVMF 人绒毛间充质成纤维细胞 Human Villous Mesenchymal Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial

脂肪细胞系统

KL7200 HAMEC 人脂肪微血管内皮细胞 Human Adipose Microvascular Endothelial Cells 1 x 10^6 cells/vial

KL7210 HPA-v 人前脂肪细胞--内脏 Human Preadipocytes-visceral 1 x 10^6 cells/vial

KL7220 HPA-s 人前脂肪细胞--皮下 Human Preadipocytes-subcutaneous 1 x 10^6 cells/vial

女性生殖细胞系统

KL7300 HOMEC 人卵巢微血管内皮细胞 Human Ovarian Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL7310 HOSEpiC 人卵巢表层上皮细胞 Human Ovarian Surface Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL7330 HOF 人卵巢成纤维细胞 Human Ovarian Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial

KL7600 HMMEC 人乳腺微血管内皮细胞 Human Mammary Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL7610 HMEpiC 人乳腺上皮细胞 Human Mammary Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL7630 HMF 人乳腺成纤维细胞 Human Mammary Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial

间充质干细胞系统

KL7140 HAMSC 人羊膜间充质基质细胞 Human Amniotic Mesenchymal Stromal Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL7150 HCMSC 人绒毛膜间充质基质细胞 Human Chorionic Mesenchymal Stromal Cells 5 x 10^5 cells/vial