BTL2013牛trim5α基因沉默细胞株完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

BTL2013牛trim5α基因沉默细胞株冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

BTL2013牛trim5α基因沉默细胞株复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

BTL2013牛trim5α基因沉默细胞株复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL4800 HNPC 人髓核细胞 Human Nucleus Pulposus Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL4810 HAPC 人脊髓纤维环细胞 Human Anulus Pulposus Cells 5 x 10^5 cells/vial

肝细胞系统

KL5000 HHSEC 人肝窦内皮细胞 Human Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL5100 HIBEpiC 人肝内胆管上皮细胞 Human Intrahepatic Biliary Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL5200 HH 人肝细胞 Human Hepatocytes 1 x 10^6 cells/vial

KL5200-2 HH 人肝细胞 Human Hepatocytes 2 x 10^6 cells/vial

KL5300 HHSteC 人肝星形细胞 Human Hepatic Stellate Cells 5 x 10^5 cells/vial

胆囊细胞系统

KL5430 HGBF 人胆囊成纤维细胞 Human Gallbladder Fibroblasts 5 x 10^5 cells per 1ml

脾细胞系统

KL5500 HSEC 人脾血管内皮细胞 Human Splenic Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL5530 HSF 人脾成纤维细胞 Human Splenic Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial

心脏细胞系统

KL6000 HCMEC 人心脏微血管内皮细胞 Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL6020 HCAEC 人冠状动脉内皮细胞 Human Coronary Artery Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL6100 HAEC 人主动脉内皮细胞 Human Aortic Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL6110 HASMC 人主动脉平滑肌细胞 Human Aortic Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial

KL6120 HAF 人主动脉成纤维细胞 Human Aortic Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial