BHK21幼仓鼠肾传代细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

BHK21幼仓鼠肾传代细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

BHK21幼仓鼠肾传代细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

BHK21幼仓鼠肾传代细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLTC-axbz-270 615小鼠乳腺癌瘤株 Ca763

KLTC-axbz-271 615小鼠T细胞性白血病瘤株 L7712

KLTC-axbz-272 615小鼠T细胞性白血病瘤株 L7912

KLTC-axbz-273 615小鼠肺癌瘤株 HP615

KLTC-axbz-274 615小鼠滑膜肉瘤瘤株 ZM755

KLTC-axbz-275 615小鼠乳头状肺腺癌瘤株 P615

KLTC-axbz-276 KM小鼠子宫颈癌瘤株 U27

KLTC-axbz-277 KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株 LⅡ

KLTC-axbz-278 KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株 G422

KLTC-axbz-279 615小鼠网织细胞性白血病瘤株 L615

KLTC-axbz-280 Walker氏癌肉瘤256瘤株 W256

KLTC-axbz-281 C57小鼠黑色素瘤瘤株 ME

KLTC-axbz-282 KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株 B22

KLTC-axbz-283 小鼠Lewis肺癌瘤株 LLT

KLTC-axbz-284 615小鼠前胃癌瘤株 Fc

KLTC-axbz-285 小鼠乳腺癌细胞株 EMT-6

KLTC-axbz-286 小鼠肾癌细胞株 RuCa

KLTC-axbz-287 大鼠肉瘤细胞 WK256

KLTC-axbz-288 小鼠乳腺癌细胞 MA891

KLTC-axbz-289 大鼠*癌细胞株 DSL-6A/C1

KLTC-axbz-290 小鼠骨髓瘤细胞 NS1

KLTC-axbz-291 大鼠卵巢癌细胞株 NUTU-19

KLTC-axbz-292 小鼠肾癌细胞 Ranca

KLTC-axbz-293 小鼠胚胎成纤维细胞 3T3-swiss albino

KLTC-axbz-294 小鼠胚胎成纤维细胞 3T3 clone A31

KLTC-axbz-295 小鼠*腺泡细胞癌细胞 MPC-83

编号 中文 英文名称

KLTC-axbz-296 小鼠白血病细胞 C3

KLTC-axbz-297 小鼠β胰岛素瘤细胞 RIN-m5F

KLTC-axbz-298 小鼠自发高乳腺癌细胞 TA2

KLTC-axbz-299 小鼠淋巴瘤细胞 Nb2－11

KLTC-axbz-300 小鼠骨髓瘤细胞 NS-1