NBS新生牛睾丸支持细胞系完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

NBS新生牛睾丸支持细胞系冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

NBS新生牛睾丸支持细胞系复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

NBS新生牛睾丸支持细胞系复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLTC-axbz-137 鼠纤维肉瘤细胞系 WEHI 164

KLTC-axbz-138 小鼠B淋巴细胞 WEHI 231

编号 中文 英文名称

KLTC-axbz-139 大鼠垂体细胞 RPC

KLTC-axbz-140 小鼠垂体细胞 MPC

KLTC-axbz-141 兔子垂体细胞

KLTC-axbz-142 狗垂体细胞

KLTC-axbz-143 鼠肝癌细胞系 MM45T.Li

KLTC-axbz-144 小鼠成纤维细胞系 McCoy

KLTC-axbz-145 大鼠肝癌细胞（乳腺癌细胞接种到*成瘤） Walker-256

KLTC-axbz-146 大鼠肝癌细胞（wistar 大鼠） CBRH7919

KLTC-axbz-147 小鼠结肠癌 C26

KLTC-axbz-148 稳定转染了neor和LIF基因的STO细胞株 SNL

KLTC-axbz-149 小鼠艾氏腹水瘤细胞 ECA

KLTC-axbz-150 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞 RIN-m

KLTC-axbz-151 小鼠杂交瘤细胞 ST2/o

KLTC-axbz-152 小鼠肾癌细胞 RenCa

KLTC-axbz-153 小鼠胰岛素瘤β细胞（NOD/Lt转基因小鼠，SV40巨T抗原） NIT-1

KLTC-axbz-154 早代小鼠胚胎成纤维细胞 MEF

KLTC-axbz-155 中国仓鼠肺细胞 V79

KLTC-axbz-156 兔的肝细胞 VX2

KLTC-axbz-157 鸡胚原代肝细胞 CEL

KLTC-axbz-158 129小鼠ES细胞 D3

KLTC-axbz-159 129小鼠ES细胞 E14

KLTC-axbz-160 BALB/c小鼠ES细胞 B/c-ES

KLTC-axbz-161 猴的骨髓间充质干细胞 MSCS

KLTC-axbz-162 SD大鼠骨髓间充质干细胞 SDBMSC

KLTC-axbz-163 鼠胸腺激酶缺陷细胞株 L-MTK

KLTC-axbz-164 鼠胚成纤维细胞系 STO

KLTC-axbz-165 鼠乳腺癌细胞系 MA-782

KLTC-axbz-166 鼠成纤维细胞系 GR

KLTC-axbz-167 杂交瘤细胞枝原体阳性 B6YH4

KLTC-axbz-168 鼠细胞系 B82