XMRPDSC2012大鼠*导管干细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

XMRPDSC2012大鼠*导管干细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

XMRPDSC2012大鼠*导管干细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

XMRPDSC2012大鼠*导管干细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KLTC-axbz-040 大鼠神经胶质瘤细胞 C6

KLTC-axbz-041 小鼠脑神经瘤细胞 Neuro-2a

KLTC-axbz-042 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 PC12

编号 中文 英文名称

KLTC-axbz-043 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化) PC-12

KLTC-axbz-044 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化) PC-12

KLTC-axbz-045 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化) PC-12

KLTC-axbz-046 小鼠睾丸间质细胞瘤细胞 MLTC-1

KLTC-axbz-047 小鼠前列腺癌细胞 RM-1

KLTC-axbz-048 小鼠肛门肉瘤细胞 S-180

KLTC-axbz-049 鼠肝星形细胞 HSC-T6

KLTC-axbz-050 大鼠正常肝细胞 BRL-3A

KLTC-axbz-051 大鼠肝细胞 BRL大鼠Buffalo

KLTC-axbz-052 小鼠成纤维细胞 3T3

KLTC-axbz-053 小鼠Mo-MuLv感染的3T3细胞 Mo-MuLV/3T3

KLTC-axbz-054 小鼠成纤维细胞 3T3NIH

KLTC-axbz-055 逆转录病毒包装的NIH3T3细胞 PA317

KLTC-axbz-056 小鼠成纤维细胞 L929

KLTC-axbz-057 小鼠脂肪细胞 L13T3

KLTC-axbz-058 小鼠巨噬细胞 Ana-1

KLTC-axbz-059 小鼠精母细胞

KLTC-axbz-060 中国仓鼠肺细胞 CHL

KLTC-axbz-061 中国仓鼠卵巢细胞 CHO

KLTC-axbz-062 中国仓鼠仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1

KLTC-axbz-063 转血小板基因仓鼠卵巢细胞 CHO-pt

KLTC-axbz-064 转入Tet-off调控，含EGFP基因的CHO细胞 CHO-AA8

KLTC-axbz-065 绿猴肾细胞 Vero

KLTC-axbz-066 非洲绿猴非洲绿猴肾细胞 VERO C1008 (E6)

KLTC-axbz-067 猴肾细胞系 VERO E6

KLTC-axbz-068 SV40转化的非洲绿猴肾细胞 COS-7

KLTC-axbz-069 狗肾细胞 MDCK

KLTC-axbz-070 大鼠肝星形细胞 CFSC-8B