HSF人皮肤成纤维细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

HSF人皮肤成纤维细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

HSF人皮肤成纤维细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

HSF人皮肤成纤维细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

HTR-8 KL0433 人滋养细胞,HTR-8细胞

AsPC- KL0434 人转移*腺癌细胞,AsPC-细胞

Aspc-1 KL0435 人转移*癌细胞,Aspc-1细胞

CRL-1999 KL0436 人主动脉血管平滑肌细胞,T/G HA-VSMC细胞 T/G HA-VSMC

HA-VSMC KL0437 人主动脉血管平滑肌细胞,HA-VSMC细胞

HRC-99 KL0438 人直肠腺癌细胞系 HRC-99细胞

HBE KL0439 人支气管上皮细胞,HBE细胞

BEAS-2B KL0440 人支气管上皮细胞,BEAS-2B细胞

JRDC114 KL0441 人支气管上皮细胞,16HBE细胞, 16HBE

MDA-kb2 KL0442 人正常乳腺细胞,MDA-kb2细胞

LGZC014 KL0443 人正常乳腺上皮细胞,MCF-10A细胞, MCF-10A

human MCF10A KL0444 人正常乳腺上皮细胞,human MCF10A细胞

RWPE-2 KL0445 人正常前列腺上皮细胞,RWPE-2细胞

RWPE-1 KL0446 人正常前列腺上皮细胞,RWPE-1细胞

WPMY-1 KL0447 人正常前列腺基质永生化细胞,WPMY-1细胞

JRDC049 KL0448 人正常皮肤细胞,Hacat细胞, Hacat

LGZC005 KL0449 人正常肝细胞,LO2细胞, LO2

human QSG-7701 KL0450 人正常肝细胞,human QSG-7701细胞

human L02 KL0451 人正常肝细胞,human L02细胞

HL-7702 KL0452 人正常肝细胞,HL-7702细胞

HBL-100 KL0453 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞,HBL-100细胞

LGZC004 KL0454 人张氏肝细胞,Chang liver细胞, Chang liver

JRDC009 KL0455 人原位*腺癌细胞,BxPC-3细胞, BxPC-3

BxPc-3-EGFP-puro KL0456 人原位*腺癌细胞,BxPc-3-EGFP-puro细胞

HL-60 KL0457 人原髓细胞白血病细胞,HL-60细胞

AL7P/HL-60R KL0458 人原髓细胞白血病细胞,AL7P/HL-60R细胞

293 Ad5+ KL0459 人原胚肾转化细胞系 293 Ad5+细胞

UT-7 KL0460 人原巨核细胞型白血病细胞,UT-7细胞

HaCaT KL0461 人永生化表皮细胞,HaCaT细胞

LGZC011 KL0462 人永生化鼻咽上皮细胞系 NP69细胞, NP69

HPAC KL0463 人*腺泡上皮癌 HPAC细胞

Panc 10.05 KL0464 人*腺癌细胞,Panc 10.05细胞