CEF鸡胚成纤维细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

CEF鸡胚成纤维细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

CEF鸡胚成纤维细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

CEF鸡胚成纤维细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

HTB-144 KL0331 胎盘绒毛癌细胞,JAR细胞 JAR

FBM KL0332 胎儿骨髓间充质细胞,FBM细胞

KL0333 塔宾曲霉 ACCC 30165

TC-jcyj0144 KL0334 宋氏志贺氏菌

KL0335 斯氏油脂酵母 CICC 1715

KL0336 丝状链霉菌 ATCC19753

KL0337 水螺菌 ATCC49643

MV.1.Lu KL0338 水貂肺上皮细胞,MV.1.Lu细胞

KL0339 树状微杆菌 ATCC4358

K6H6/B5 KL0340 鼠杂交骨髓瘤细胞,K6H6/B5细胞

L-MTK KL0341 鼠胸腺激酶缺陷细胞株 L-MTK细胞

C8-D1A KL0342 鼠小脑细胞,C8-D1A细胞

WEHI 164 KL0343 鼠纤维肉瘤细胞系 WEHI 164细胞

B82 KL0344 鼠细胞系 B82细胞

TC-jcyj0135 KL0345 鼠伤寒沙门氏菌

MA-782 KL0346 鼠乳腺癌细胞系 MA-782细胞

S-180-S2D9 KL0347 鼠肉瘤细胞,S-180-S2D9细胞

CRIC100 KL0348 鼠胚胎成纤维细胞,3T3-Swiss细胞, 3T3-Swiss

STO KL0349 鼠胚成纤维细胞系 STO细胞

3T3-E1 KL0350 鼠胚成骨细胞,3T3-E1细胞

PT67 KL0351 鼠逆转录酶病毒包装细胞,PT67细胞

TC-jcyj0071 KL0352 鼠李糖乳杆菌

C2C12 KL0353 鼠肌原细胞,C2C12细胞

B16-Fo KL0354 鼠黑色素瘤细胞系 B16-Fo细胞

SP2/0-Ag14 KL0355 鼠骨髓瘤细胞,SP2/0-Ag14细胞

CRIC093 KL0356 鼠骨髓瘤 J558L细胞, J558L

HSC-T6 KL0357 鼠肝星形细胞,HSC-T6细胞

MM45T.Li KL0358 鼠肝癌细胞系 MM45T.Li细胞

H22-H8D8 KL0359 鼠肝癌细胞,H22-H8D8细胞

EAC-E2G8 KL0360 鼠腹水瘤 EAC-E2G8细胞

J774A.1 KL0361 鼠腹水单核细胞瘤 J774A.1细胞

GR KL0362 鼠成纤维细胞系 GR细胞

KL0363 噬糖盐红菌 ATCC29252

KL0364 嗜盐细菌属 DSMZ16465