NK-92MI人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞完全培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮样；多角形

细胞传代：1:2-1:4传代；每周2-3次

NK-92MI人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞冻存步骤：我们实验室是按1:3:6 配冻存液1份甘油3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基):

⑴ 吸出旧培养液加PBS冲洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止

⑷ 离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）

⑸ 吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存。

NK-92MI人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏操作步骤如下：

1 将培养基置于37℃回温，回温后将其用75%酒精擦拭，移入无菌操作台内；

2 戴上护目镜，厚毛线手套之后，从液氮罐中取出细胞冷冻管。若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，放入37-40℃水浴中，并不时摇动，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，转移到已加入10ml培养液的离心管内；

3 在1,000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2温箱静置培养；

4 次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代；否则，及时更换培养基继续培养。

NK-92MI人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞复苏注意事项如下：

A.复苏细胞请一定要注意安全，尤其是来自客户的细胞。在放入液氮容器之前就应该检查冻存管是否拧紧。取出复苏时若有液氮进入，请一定要拧松冻存管，排出液氮，防止温度升高时爆炸。

B. 细胞复苏时需使用指定培养液。绝大多数细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类，若因实验需要，必须有所不同，须以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行实验。

C. 细胞复苏时可以暂时不使用抗生素（G418等），以利于细胞的恢复。

D.细胞复苏前需检查恒温水浴锅的温度是否已经适宜。

KL-pc-r046 大鼠肠上皮细胞

KL-pc-r047 肠巨噬细胞 Intestinal macroKLages

KL-pc-r048 肾实质细胞 Renal parencKLma cells

KL-pc-r049 肾系膜细胞 Renal mesangial cells

KL-pc-r050 膀胱上皮细胞 Bladder epithelial cells

KL-pc-r051 膀胱平滑肌细胞 Bladder smooth muscle cells

KL-pc-r052 肾动脉内皮细胞 Renal artery endothelial cells

KL-pc-r053 肾动脉平滑肌细胞 Renal artery smooth muscle cells

KL-pc-r054 肾小管上皮细胞 Tubular epithelial cells

KL-pc-r055 膀胱成纤维细胞 Bladder fibroblasts

KL-pc-r056 肾足突细胞 Renal podocytes

KL-pc-r057 肾小管平滑肌细胞 renal tubular Smooth musclecells

KL-pc-r058 输尿管平滑肌细胞 Ureteral smooth muscle cells

KL-pc-r059 大鼠肾小球内皮细胞

KL-pc-r060 大鼠前列腺上皮细胞

KL-pc-r061 大鼠肾成纤维细胞

KL-pc-r062 大鼠尿道上皮细胞

KL-pc-r063 大鼠输尿管上皮细胞

KL-pc-r064 大鼠肾管状上皮细胞

KL-pc-r065 子宫内膜上皮细胞 Endometrial epithelial cells

KL-pc-r066 卵巢颗粒细胞 Granulosa cells

KL-pc-r067 子宫颈上皮细胞 Cervical epithelial cells

KL-pc-r068 子宫平滑肌细胞 Uterine smooth muscle cells

KL-pc-r069 卵巢上皮细胞 Ovarian epithelial cells

KL-pc-r070 子宫成纤维细胞 Uterine fibroblast ce

KL-pc-r071 卵巢成纤维细胞 Ovarian fibroblasts cells

KL-pc-r072 淋巴管内皮细胞 LymKLatic epithelial cells

KL-pc-r073 淋巴成纤维细胞 LymKLoid fibroblasts

KL-pc-r074 外周血白细胞 PeriKLeralblood lymKLocytes

KL-pc-r075 骨髓基质细胞 Bone marrow stromal cells

KL-pc-r076 胰岛细胞 Islet cells

KL-pc-r077 乳腺上皮细胞 Mammary epithelial cells

KL-pc-r078 甲状腺上皮细胞 TKLroid epithelial cells

KL-pc-r079 大鼠*星状细胞

KL-pc-r080 大鼠*导管上皮细胞