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| 产地 | 上海 |
| 保存条件 | 常温或-80℃液氮保存 |
| 品牌 | 康朗生物 |
| 货号 | KL-C2310M-R |
| 用途 | 该产品仅供科研实验使用 |
| 组织来源 | |
| 细胞形态 | |
| 是否是肿瘤细胞 | |
| 保质期 | |
| 器官来源 | |
| 免疫类型 | |
| 品系 | 细胞系 |
| 生长状态 | |
| 物种来源 | 大鼠 |
| 包装规格 | 1*10^6cells/T25培养瓶 |
| 是否进口 | 否 |
hCMEC/D3-RFP细胞
细胞详情 | |
细胞名称 | hCMEC/D3-RFP红色荧光蛋白标记的人脑微血管内皮细胞 |
货 号 | KL-1747H-R |
组织来源 | 人 |
细胞形态 | 内皮细胞样 |
生长方式 | 贴壁生长 |
描 述 | hCMEC/D3细胞系来源于人颞叶微血管,这些微血管是从癫痫手术切除的组织中分离出来的。原代分离物富含脑内皮细胞(CECs)。在第一代中,通过慢病毒载体转导人端粒酶催化亚基(hTERT)和SV40大T抗原,使细胞永生化,然后通过有限稀释克隆选择性分离CEC,克隆具有广泛的脑内皮表型特征。这种脑微血管内皮细胞系代表了一种人类血脑屏障的模型,这种模型很容易生长,并且适合于与中枢神经系统(CNS)相关的病理和药物转运机制的细胞和分子研究。 |
构建信息 | hCMEC/D3-RFP细胞为慢病毒感染hCMEC/D3细胞得到的稳定表达红色荧光蛋白的细胞系。所用载体为HBLV-mcherry-PURO。 |
培养条件 | ECM;空气95%,二氧化碳5%;37℃培养 |
换液频率 | 2-3天 |
传代周期 | 3-5天 |
传代比例 | 1:3-1:5 |
冻存液配方 | 95%完全培养基,5%DMSO |
安全性 | BSL-2 |
供应限制 | 仅供研究之用。 |
细胞操作详细步骤
--悬浮细胞
1.细胞复苏
1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。
1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到5ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
2.细胞传代
第一种方法:
2.1细胞密度达到2×106细胞/ml时,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
第二种方法:
2.2细胞密度达到2×106细胞/ml时,将培养瓶中的细胞悬液分装到新的培养瓶,并补充新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
3.细胞冻存
将培养瓶中的细胞悬液转移到离心管中,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度1-2×106细胞/ml。将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用,保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
