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即用型荧光定量PCR试剂盒-荧光试剂盒
起批量( 价格
≥1 ¥230元/盒
  • 供货能力:大量
  • 最低订购量:1盒
  • 可销售总数量:20盒
  • 建议零销价:230元/盒
  • 发布日期: 2017-08-22
  • 更新日期: 2018-12-19
产品详细说明
品牌: KALANG 产地: 中国/上海
货号: KL90408-1 含量: 99
产品规格: 1mL 产品英文名称: Instant Fluorescent qPCR Kit
CAS编号: 别名: 即用型荧光定量PCR试剂盒
分子式:

即用型荧光定量PCR试剂盒-荧光试剂盒产品及特点

本产品是基于荧光染料检测的即用型双酶一管式RT-PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量RT-PCR分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、MMLV-Taq DNA聚合酶混合物、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有一管式实时定量RT-PCR所需要的成分,用户只需加入RNA模板和引物即可进行实时定量RT-PCR反应,具有广泛的用途。

一管式完成qRT-PCR反应,避免样品交叉污染,尤其适合临床应用。

即开即用,用户不需要单独准备qRT-PCR所需的各种试剂。

主要成分只有两个(RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix),将加样步骤减少到*,极大降低了加样误差,增加了可重复性。

使用范围广,适用于从病毒RNA到人RNA的各种RNA模板。

高灵敏度,每个RT-PCR体系*可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的最长达2000 nt。

 

即用型荧光定量PCR试剂盒-荧光试剂盒规格及成分

成  份

50次

塑料袋包装

300次

塑料袋包装

双酶一管式qRT-PCR Buffer,2×

750 uL

4.5 mL

MMLV-Taq Mix

100 uL

600 uL

RNase-free水

1 mL

6 mL

即用型荧光定量PCR试剂盒-荧光试剂盒使用手册

1份

1份

运输及保存

低温运输,-20℃保存, 保存期限为一年。

自备试剂

RNA模板、引物。有的机型需要自备ROX。

使用方法

在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分(下面只列出样品管的设置情况,用户可自己根据需要设置阳性和阴性对照):

成分

样品

自备RNA模板(分下面三种情况)

见下

总RNA

100-500 ng

或poly(A) mRNA

10-500 ng

或体外转录得到的专一RNA

0.01 pg-500ng

RNA特异性引物一(自备)

终浓度300nM(注1)

RNA特异性引物二(自备)

终浓度300nM

RNase-free水

补到10 uL

双酶一管式qRT-PCR Buffer(2×)

15 uL

自备ROX(某些荧光PCR机型需要)

3 uL(注2)

MMLV-Taq Mix

2 uL

即用型荧光定量PCR试剂盒-荧光试剂盒注1:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM范围内调整引物浓度。引物、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减RNase-free水用量,保证总反应体积不变即可。

注2:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的*浓度为1×(即在每30 uL 反应体系中加3 uL 10×ROX)。对ABI 7500, ROX的*浓度为0.05-0.1×(每30 uL 反应体系加0.3 uL 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入3 uL 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。对于iCycler IQ, MJ Opticon, MJ Chromo4, MX3000, MX4000, RotorGene3000, RotorGene 6000 和 LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。

轻柔混合均匀后放入PCR仪中进行荧光定量RT-PCR。

设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃ 30分钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm值和PCR产物长度由用户自行决定注)、*72℃ 5分钟。并在退火或延长步骤中记录荧光信号。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,*吸收光谱在471nm,结合DNA时的*吸收光谱在500nm,*发射光谱在530nm。

 

即用型荧光定量PCR试剂盒-荧光试剂盒关联产品

即用型荧光定量PCR试剂盒、PCR级绿如蓝染料。